Высокоэффективная жидкостная хроматография AZURA

Опубликовано: 17.05.2019

Анализ пигментов фотосинтезирующих организмов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Метод используется для определения качественного и количественного состава пигментов в фотосинтетических мембранах ряда бактерий.

Анализ пигментов проводится на колонке Spherisorb ODS2 5 мкм “Waters” (США), на сайте http://www.thnl.eu/Vysokoeffektivnaia-zidkostnaia-hromatografiia. В качестве носителя в ней используется диоксид кремния с пришитой С18 алкильной группой, а содержание углерода составляет 11.5%.
Для разделения смеси пигментов применяется подход с постепенно увеличивающимся градиентом концентрации этилацетата. Для этого используются следующие растворы: Раствор « А» : 23% Этилацетат+77% раствора « С» ; Раствор « B» : чистый этилацетат; Раствор « С» : ацетонитрил : вода – 9: 1(V).
В начале анализа колонка уравновешена раствором « С» . После нанесения пробы на колонку первые три минуты через неё пропускается раствор «А», затем данный раствор линейно замещается раствором « В» в течение 37 мин. И последние 3 мин через колонку пропускается чистый раствор « В» . После проведения анализа колонку регенерируют, промывая раствором « С» в течение 20 минут.
Содержание пигментов оценивается исходя из площади полосы данного вещества на хроматограмме в области 415-550 нм, с помощью программы LC-solution (“Shimadzu”, Япония) и соответствующих коэффициентов экстинкции.

В рамках школы предлагается измерить содержание пигментов в фотосинтетических мембранах Alc. minutissimum с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Контакты: Большаков Максим Александрович. e-mail: [email protected]

rss